大鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒操作步驟

   大鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒

   貨號：BS-2877

   名稱：大鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒

   規格：96T/48T

   基本信息：

   檢測原理?：主流采用?雙抗體夾心法?檢測，預包被AIF特異性抗體，樣本中AIF結合后，再加入HRP標記檢測抗體形成復合物，通過TMB顯色定量，產物顏色深淺與AIF濃度正相關。

   適用樣本?：大鼠血清、血漿、組織勻漿、細胞培養上清、細胞裂解液。

   核心性能（通用標準）?：檢測范圍通常為0.1ng/mL-8ng/mL，低檢測限≤0.05ng/mL；板內變異系數CV<10%，板間CV<15%，特異性不與其他凋亡相關蛋白交叉反應。

   操作步驟：

   實驗前準備?：試劑盒從2-8℃取出，室溫平衡30分鐘；20×濃縮洗滌液按1:19比例用蒸餾水稀釋；凍干標準品復溶后做倍比稀釋，得到5-7個梯度濃度。

   加樣孵育?：設置空白、標準品、待測樣本孔，標準品孔加50μL對應濃度標準品，待測樣本孔先加40μL稀釋液再加10μL樣本（稀釋倍數5倍），封板后37℃孵育60分鐘。

   洗滌加酶?：洗滌5次拍干后，除空白孔每孔加100μLHRP標記檢測抗體，重新封板37℃孵育60分鐘，再次洗滌5次拍干。

   顯色讀數?：每孔依次加50μL顯色劑A、50μL顯色劑B，37℃避光顯色15分鐘，加50μL終止液終止，15分鐘內用酶標儀450nm波長讀數。

   結果計算?：四參數擬合標準曲線，根據樣本OD值查出濃度后乘以稀釋倍數，得到終AIF實際濃度。

   使用注意事項：

   選型時優先選擇?雙單抗配對?的試劑盒，特異性更好，能降低非特異性結合導致的背景偏高問題；若檢測細胞樣本，需確認產品標注支持細胞裂解液檢測。

   大鼠組織樣本需要提前預處理：組織塊勻漿后離心取上清，去除碎片沉淀后再檢測，避免堵孔或干擾顯色。

   實驗必須設置復孔和陰陽性對照，若標準曲線線性R2＜0.98，需要排除標準品降解或操作誤差，重新實驗。

   注：以上科研產品資料供參考!

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